北京时间2024年3月23日20:36（拜科努尔时间23日17:36），搭载跨国乘组的“联盟MS-25”载人飞船由“联盟2.1a”运载火箭从拜科努尔航天发射中心31号工位点火发射，530秒船箭分离，飞船进入交会对接轨道。此次发射原定于北京时间3月21日21:21实施，由于火箭电气系统电池电压读数偏低，在发射倒计时20秒时地面系统自动终止了发射。
左起：特雷西·C·戴森、奥列格·诺维茨基、玛丽娜·瓦西列夫斯卡娅
“联盟MS-25”载人飞船搭载了由3国航天员组成的乘组，包括指挥官俄罗斯航天员奥列格·诺维茨基（Oleg Novitskiy）、白俄罗斯航天员玛丽娜·瓦西列夫斯卡娅（Marina Vasilevskaya）和美国航天员特雷西·C·戴森（Tracy C. Dyson），其中女性航天员占比达到三分之二。
“联盟MS-25”乘组将与“联盟MS-24”乘组航天员奥列格·科诺年科（俄）、尼古拉·丘布（俄）、劳拉·奥哈拉（美）交叉驻留约12天。乘组航天员诺维茨基、瓦西列夫斯卡娅都是短期航天员，仅有戴森为长期航天员，完成交叉驻留后，诺维茨基、瓦西列夫斯卡娅将与奥哈拉一道乘坐“联盟MS-24”飞船于4月上旬撤离空间站。与此同时，“联盟MS-24”乘组航天员科诺年科、丘布则将继续驻留空间站，直到9月与戴森一道乘坐“联盟MS-25”飞船返回。
“联盟MS-25”载人飞船将采用交会对接2天方案上行，于北京时间3月25日23:09接于国际空间站俄罗斯部分“码头号”节点舱，整个上行过程将耗时50小时33分钟。北京时间26日01:40，空间站和飞船舱门将打开，“联盟MS-25”乘组将正式进驻空间站。
由下至上依次为推进舱、返回舱、轨道舱
本次任务使用了俄罗斯“联盟MS”载人飞船，该飞船采用3舱串联构型，竖直状态从下至上依次是推进舱、返回舱、轨道舱，其中返回舱空间3.5立方米，轨道舱5立方米，可载3人，发射质量约7300千克，含800千克可用推进剂。
“联盟2.1a”为中型低温液体运载火箭，采用两级半构型，由芯一级、芯二级及4枚助推器构成，主动力全部采用液氧煤油发动机。该箭长51.31米（含逃逸塔），芯级最大直径2.95米，起飞质量313吨，起飞推力约423吨，其近地轨道运力为7.48吨。
此次发射是2024年“联盟2.1a”运载火箭第2次发射、拜科努尔航天发射中心第2次发射、俄罗斯第4次发射、世界第56次发射。同时，此次发射是2024年俄罗斯首次载人发射和俄罗斯载人航天第2次发射，也是本年度世界第3次载人发射和世界载人航天第7次发射。
